lunes, 18 de mayo de 2009

Investigacion sobre bacterias










Paramecium
Los paramecios del genero Paramecium son protozoarios con forma de suela de zapato o elipsoide.Son habituales en aguas dulces estancadas con abundante materia organica.El tamaño
general de los paramecios es 0.05 milimetros.Carecen de flagelos,pero los cilios son muy abundantes en su superficie.Estos le dan movimiento.


Escherichia coli.
Es una bacteria que generalmente se encuentra en los intestinos de animales y en aguas negras.Produce vitaminas B y K .Es un bacilo que reacciona negativamente a la tincion de Gram.Es movil por flagelos peritricos,no forma esporas y es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa.




Salmonella thypi
La salmonella es un bacilo gramnegativo.Esta bacteria causa enfermedades parecidas a la fiebre tifoidea.Es de forma de capsula con algunos flagelos que le dan movilidad.



Proteus.
Proteus es un genero de bacterias gramnegativas,que incluye sus especies.Las proteus no fermentan lactosa.Tienden a ser organismos pleomorficos,no esporulados y no encapsulados.Son productoras de fenifelalanina.Son delgadas con flagelos a su alredeor para su movimiento.




Brucella
Son cocobacilos pequeños de 0.5 a 0.7 por 0.6 a 1.5 micrometros.No moviles y encapsulados.Dependiendo de su especie es en que huésped se aloja.Son de forma oblicua y generalmente se agrupan entre si.

viernes, 8 de mayo de 2009

Practica 3

Practica # 3

Pipeteo




Alumno:Ilan Alonso Parrra Hernandez.



Materia:Operar equipo y materiales de laboratorio.



Maestro:Victor Manuel Alfaro Lopez.




Grupo:2LM




Fecha:23/04/09











Introducción.

En esta practica se llevo a cabo el pipeteo para aprender a manejar y utilizar esta habilidad que es muy util en el laboratorio.



Objetivo.

Aprender la tecnica de pipeteo para posteriormente utilisar esta tecnica en diversas practicas y analisis de laboratorio.




Desarrollo.

Se utilizo cada una de las pipetas para pipetear agua y ponerla en las probetas comparando el volumen absorbido entre estas.Tambien se utiliso la tecnica de puntear con la pipeta Pastuer y la pipeta automatica.Las pipetas utilisadas fueron:

1 Pipeta volumetrica de 10 ml

1 Pipeta volumetrica de 5 ml

1 Pipeta volumetrica de 100 ml

1 matraz Erlenmeyer

1 Probeta graduada.

1 Pipeta automatica con capacidad de 100 ul

1 Vidrio de reloj.

1 Pipeta Pasteur.



Conclusiones.

Fue bueno aprender a pipetear ya que es muy util,parecia muy sencillo la tecnica pero no lo era.Es muy util para después en otras actividades del laboratorio.

Investigacion de proteus,brucella y salmonella

INVESTIGACION DE LAS CLASIFICACIONES DE LAS BACTERIAS( salmonella , brucela abortus , proteus)


Investigacion de las clasificacion de las bacterias
Salmonella
Crece con facilidad en agar sangre formando colonias de 2 a 3 milimetros en el labgoratorio clinico de microscopio ..se aisla con medios selectivos selenito hektoen ss o xld para inhibir el crecimiento de otras bacterias patogenas y de la flora intentinal saprofila. Tienen lo siguientes antigenos
Somatico o del lipolisacarido en la pared celular tempoestables y es la base de la clasificacion en subgrupos
Flagelar H de la proteina flagelina termolabil es la base de la clasificacion de especies
Envoltura VI termolabil responsables de la virulencia de varias especies patogenas
La especie S. enterica tiene seis
subespecies (a veces presentadas como subgrupos bajo numeración romana):
I enterica
II salamae
IIIa arizonae
IIIb diarizonae
IV houtenae
V S. bongori, ya incluida en una especie distinta
VI indica
Cada subespecie a su vez, está conformada por diversos serotipos, habiéndose identificado hasta la fecha más de 2500. Una de ellas es S. enterica subsp. enterica (o subgrupo I), se divide en cinco
serogrupos: A, B, C, D y E. Cada serogrupo comprende múltiples componentes, son las serovariedades (serotipos).
Esta clasificación implica una terminología de uso poco práctico en la clínica bacteriológica, por lo tanto, en términos médicos, la nomenclatura es diferente y simplificada, pues se consideran los nombres de los serotipos (serovaridades) de Salmonella como si fuesen nombres de especies. Por ejemplo, "Salmonella entericaentérica serotipo Typhimurium", se refiere como "Salmonella typhimurium" subgrupo
ESPECIES : -s .bongril -s. enterica -s. enteridis -s. myanza -s. paratyphi -s. tvphi -s. virginia -s. typhimoriom clasificacion cientifica : reino--bacterial filo--proteobacterial clase--gamma proteobacterea orden--entreobacteriales familia--entreobacteriales medida--(entres 0,5 y sum)

BRUCELA ABORTUS
La brucela abortus es una bacteria tambien llamada fiebre malta o fiebre ondulante es una enfermedad que ataca causando la brucelosis humana-
SE CLASIFICAN EN :
-Brucella melitensis -Brucella suis -Brucella abortus -Brucella canis
-Brucella neotomae -Brucella onis
SINTOMAS:
-Fiebre ondulante -fiebre melitensis -fiebre de malta -fiebre de traum -fiebre de chipre -fiebre de bang
PROTEUS :
El Síndrome de Proteus es una
enfermedad congénita que causa un crecimiento excesivo de la piel y un desarrollo anormal de los huesos, normalmente acompañados de tumores en más de la mitad del cuerpo. Proteus es un genero de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario.[1] Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razón de tener una β galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron). Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles.[2] Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa.[3] Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol.
CLASIFICACION : Dominio--bacterial filo--proteobacteria clase--gama proteobactereales orden--entrebacteriales familia--entereobacriales genero--proteus
ESPECIES:
-Proteus mirabios -proteus morgani -proteus peneril -proteus rettgeri -proteus volgarts

Cuestionario de Pie de rey

Cuestionario



Alumno:Ilan Alonso Parra Hernandez.





Maestro:Victor Manuel Alfaro Lopez.




Materia:Operar equipo y materiales de laboratorio.





Grupo:2LM






Fecha:22/04/09








Cuestionario: 1 Segunda unidad .
1.- Es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, Se atribuye al cosmógrafo y matemático portugués que se llama:El pie de rey a Pedro Nuñez.
2.- En qué año se le atribuye el pie de rey al cosmógrafo y matemático portugués:1851

3.- También se ha llamado pie de rey al: Vernier o nonio.
4.- En que año se le atribuye el pie de rey al geómetra pedro Vernier:1854.

5.- ¿Qué otro nombre recibe el origen del pie de rey?Nonio o nonius.

:::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::

En los recuadros siguientes ponga el número y nombre correspondiente de la figura de medición
1
Mordazas para medidas externas
2
Mordazas para medidas internas.
3
Coliza para medidas de profundidad.
4
Escala con divisiones en centímetros y milímetros.
5
Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgadas.
6
Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros.
7
Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada.
8
Boton de deslizamiento.











Descripción del Pie de Rey o Vernier. 121 palabras utilizaras para su descripción. Consta de una "regla" con una escuadra en un extremo, sobre la cual se desliza otra destinada a indicar la medida en una escala. Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50 de milímetro utilizando el nonio. Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas. Mordazas para medidas externas. Mordazas para medidas internas. Coliza para medida de profundidades. Escala con divisiones en centímetros y milímetros. Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada. Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido. Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido. Botón de deslizamiento y freno.

Investigacion del Pie de rey

Calibre
El calibre, también denominado cartabón de corredera, pie de rey, pie de metro, pie a coliza o Vernier, es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, desde
centímetros hasta fracciones de milímetros (1/10 de milímetro, 1/20 de milímetro, 1/50 de milímetro). En la escala de las pulgadas tiene divisiones equivalentes a 1/16 de pulgada, y, en su nonio, de 1/128 de pulgadas.
Es un instrumento sumamente delicado y debe maniobrarse con habilidad, cuidado y delicadeza, con precaución de no rayarlo ni doblarlo (en especial, la coliza de profundidad).

Historia
El primer instrumento de características similares fue encontrado en un naufragio en la isla de Giglio, cerca de la costa
italiana, datado en el siglo VI a.C. Aunque considerado raro, fue usado por griegos y romanos. Durante la Dinastía Han (202 a.C. - 220 d.C.), también se utilizó un instrumento similar en China, hecho de bronce, hallado con una inscripción del día, mes y año en que se realizó.
Se atribuye al cosmógrafo y matemático portugués Pedro Núñez (1492-1577) —que inventó el nonio o nonius—, el origen del pie de rey. También se ha llamado pie de rey al vernier, porque hay quien atribuye su invento al geómetra Pierre Vernier (1580-1637), aunque lo que verdaderamente inventó fue la regla de cálculo vernier, que ha sido confundida con el nonio inventado por Pedro Núñez. En castellano, se utiliza con frecuencia la voz nonio para definir esa escala.
El calibre moderno con nonio y lectura de milésimas de pulgada, fue inventado por el americano Joseph R. Brown en 1851. Fue el primer instrumento práctico para efectuar mediciones de precisión que pudo ser vendido a un precio asequible.
Componentes
Componentes del pie de rey.
Consta de una "regla" con una escuadra en un extremo, sobre la cual se desliza otra destinada a indicar la medida en una escala. Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50 de
milímetro utilizando el nonio. Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas.
Mordazas para medidas externas.
Mordazas para medidas internas.
Coliza para medida de profundidades.
Escala con divisiones en centímetros y milímetros.
Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada.
Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido.
Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido.
Botón de deslizamiento y freno.
Otros tipos


Pie de rey digital.


Pie de rey digital.


Calibre para medir troncos de árboles.
Cuando se trata de medir diámetros de agujeros grandes que no alcanza la capacidad del pie de rey normal, se utiliza un pie de rey diferente llamado de tornero, que solo tiene las mordazas de exteriores con un mecanizado especial que permite medir también los agujeros.
Cuando se trata de medir profundidades superiores a la capacidad del pie de rey existen unas varillas graduadas de diferente longitud que permiten medir mayor profundidad.
Existen modernos calibres con lectura directa digital.

Transcrito de la camara de Neubauer

Recuento de eritrocitos: ejemplo
Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )
La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente..
Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..
El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:
Mujeres:
3.9-5.6 millones/µl
Hombres:
4.5-6.5 millones/µl
Técnicas de estudio de líneas celulares

Una suspensión celular se caracteriza por
presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido.
Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en
la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se
emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje
celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos
(cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el
"Cell Coulter"
El principio del contador celular se basa en la
medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando
una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un
pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre
los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas
que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio
desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido
como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al
volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que
circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las
partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo,
independientemente de su forma, color y densidad.
Sin
embargo
, es
posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos
basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un
microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se
coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas
señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el
microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede
determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.
La cámara de Neubauer es una cámara de contaje
adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata
de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual
se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve
en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos
lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L
corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos
está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre
con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el
volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1
milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.
Si contamos las cuatro áreas sombreada (L)
observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en
la suspensión celular será :
concentración en la suspensión (células / mL) =
10000 (x/4)
En la imagen puedes observar el aspecto de una
de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una
cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen
ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.
Existen numerosos modelos de cámaras de contaje
celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una
cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.
Para determinar la viabilidad celular se
emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán.
El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células
que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en
la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar
células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este
método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión,
determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen
otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso
de la tinción con ioduro de
propidio
se
aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge
entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a
través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.
2. Se deshecha la primera
gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución
perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse
la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de
burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el
enrasado.
3. A continuación se toma con
la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así,
la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al
1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la
pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado
la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido
de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).
4. Tomamos la pipeta (o el
tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la
goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas
por corresponder al líquido que estaba en el capilar
5. Se adapta un cubreobjetos
sobre una cámara cuentaglóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de
los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo
de la misma.
6. Una vez preparada la
cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en
reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz
débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al
fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados
pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se
procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y
alcohol-éter sucesivamente.
7.El volumen de sangre en el
cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la
cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número
de cuadrados contados.
Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1
cuadrado grande (1/20 mm de lado):
Si contamos "a" glóbulos rojos en
"n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será
a/n.
Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n
glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:
siendo X el número de glóbulos rojos existentes
por cada mm3 de sangre diluida.
Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200,
habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual
obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos
existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).
Se utilizan para calcular, mediante el uso del
microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por
unidad de voluimen de un líquido.
La cámara está constituida por
una placa base de vidrio especial pareciso a un porta, su parte central se
encuentra separada de los extremos por unas ranuras. en ella se encuentran las
cuadrículas de recuento.
La fórmula de contaje es:
partículas/mm3= partículas contadas.
Clases de cámaras:
- Neubauer improved: Es el más
utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)
- Neubauer: La diferencia es
el cuadro grande central.
- Thoma: Se utiliza solo para
el recuento de eritrocitos.
- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza
habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido
sinovial…)